詳解常用細(xì)胞凋亡檢測(cè)方法匯總！

細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)檢測(cè)<o:p></o:p> 光學(xué)顯微鏡和倒置顯微鏡<o:p></o:p> （1）未染色細(xì)胞：凋亡細(xì)胞的體積變小、變形，細(xì)胞膜完整但出現(xiàn)發(fā)泡現(xiàn)象，細(xì)胞凋亡晚期可見凋亡小體，貼壁細(xì)胞出現(xiàn)皺縮、變圓、脫落。<o:p></o:p> （2）染色細(xì)胞：常用姬姆薩染色、瑞氏染色等.凋亡細(xì)胞的染色質(zhì)濃縮、邊緣化，核膜裂解、染色質(zhì)分割成塊狀和凋亡小體等典型的凋亡形態(tài)。<o:p></o:p> 磷脂酰絲氨酸外翻分析（Annexin V法）<o:p></o:p> 磷脂酰絲氨酸（Phosphatidylserine， PS）正常位于細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)，但在細(xì)胞凋亡的早期，PS可從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜的表面，暴露在細(xì)胞外環(huán)境中。<o:p></o:p> Annexin-V是一種分子量為35~36KD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與PS高親和力特異性結(jié)合。將Annexin-V進(jìn)行熒光素（FITC、PE）或biotin標(biāo)記，以標(biāo)記了的Annexin-V作為熒光探針，利用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡可檢測(cè)細(xì)胞凋亡的發(fā)生。<o:p></o:p> 線粒體膜勢(shì)能的檢測(cè)<o:p></o:p> 線粒體在細(xì)胞凋亡的過(guò)程中起著樞紐作用，多種細(xì)胞凋亡刺激因子均可誘導(dǎo)不同的細(xì)胞發(fā)生凋亡，而線粒體跨膜電位DYmt的下降，被認(rèn)為是細(xì)胞凋亡級(jí)聯(lián)反應(yīng)過(guò) 程中最早發(fā)生的事件，它發(fā)生在細(xì)胞核凋亡特征（染色質(zhì)濃縮、DNA斷裂）出現(xiàn)之前，一旦線粒體DYmt崩潰，則細(xì)胞凋亡不可逆轉(zhuǎn)。<o:p></o:p> DNA片斷化檢測(cè)<o:p></o:p> 細(xì)胞凋亡時(shí)主要的生化特征是其染色質(zhì)發(fā)生濃縮， 染色質(zhì)DNA在核小體單位之間的連接處斷裂，形成50~300kbp長(zhǎng)的DNA大片段，或180~200bp整數(shù)倍的寡核苷酸片段，在凝膠電泳上表現(xiàn)為梯形電泳圖譜（DNAladder）。細(xì)胞經(jīng)處理后。<o:p></o:p> TUNEL法<o:p></o:p> 細(xì)胞凋亡中，染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產(chǎn)生大量的粘性3'-OH末端，可在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶（TdT）的作用下，將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過(guò)氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標(biāo)記到DNA的3'-末端，從而可進(jìn)行凋亡細(xì)胞的檢測(cè)，這類方法稱為脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法。<o:p></o:p> 凋亡相關(guān)蛋白TFAR19蛋白的表達(dá)和細(xì)胞定位分析<o:p></o:p> TFAR19（PDCD5）是由本研究室在國(guó)際上首先報(bào)導(dǎo)的一個(gè)擁有自己知識(shí)產(chǎn)權(quán)的人類新基因，前期的功能研究表明，它是促進(jìn)細(xì)胞凋亡的增強(qiáng)劑。利用熒光素（FITC）標(biāo)記的TFAR19單克隆抗體為探針，對(duì)細(xì)胞凋亡過(guò)程中TFAR19蛋白的表達(dá)水平及定位研究發(fā)現(xiàn)，凋亡早期TFAR19表達(dá)水平增高并出現(xiàn)快速核轉(zhuǎn)位現(xiàn)象。<o:p></o:p>  <o:p></o:p>

九七久久丨久久久国产99久久国产久一丨亚洲女同性同志熟女丨八个少妇沟厕小便漂亮各种大屁股丨色偷偷色噜噜狠狠网站30根丨十八禁无遮挡99精品国产丨国产精品白嫩极品美女丨亚洲v欧美v日韩v国产v

產(chǎn)品分類

詳解常用細(xì)胞凋亡檢測(cè)方法匯總！